扫描电镜技术指南——样品制备攻略

扫描电镜（SEM）是研究材料与生物微观表面结构的重要工具。我校公共实验平台靶标发现中心配备的场发射扫描电镜（ZEISS， Sigma 360）搭载多种探测器，适用于材料、纳米颗粒、细菌、细胞及动植物组织等样品的表面成像。通过采集二次电子、背散射电子、特征X射线等信号，可提供样品表面形貌、成分衬度、元素组成与分布等信息；结合能谱仪（EDS）还可实现元素的定性与半定量分析。

获得准确、清晰成像的前提在于规范的样品制备。制样质量直接决定成像效果与数据可靠性，因此遵循科学的制样方法至关重要。相比透射电镜（TEM）对样品厚度的严苛限制（通常小于100 nm），扫描电镜的样品适应性更灵活，但仍需遵循以下基本规范。

在理解上述基本规范的基础上，可针对不同物态与结构的样品，采取相应的制样策略，以获得最佳测试效果。

一、液体样品（适用于含微粒的悬浊液、胶体等）

滴片法：将超声分散后的液滴滴加至硅片、锡箔或铝箔等表面，适用于干燥后结构稳定的固体颗粒（如纳米颗粒、沉淀等）。

滴加完成后可采用自然风干、加热干燥或冷冻干燥等方式确保完全干燥，再用导电胶将载体固定在样品台上，即可上机观测。

二、粉末样品

粉末样品常存在分散不均、易飘散等问题，制样需特别谨慎。

直接贴装法：适用于无需分散、粒径较大且无漂浮倾向的样品。取针尖大小干燥粉末，用导电胶固定在样品台上，用洗耳球或空气压缩瓶严格除去未粘牢粉末，即可上机观测。

超声分散法：适用于需均匀分散的稳定粉末样品。取适量粉末加入合适分散剂中（如无水乙醇、纯水或其他不与样品反应的溶剂），超声处理5–10 min(易团聚样品可适当延长）。随后按液体样品流程进行滴片与干燥。

超声分散注意事项：

1、分散剂选择需考虑样品性质，避免发生反应。

2、若需要进行元素分析，应注意基底的影响。例如需检测Si元素时，应避免使用硅片作为基底。

三、块状样品

直接贴装：若仅观察表面形貌，可将待观察面朝上，用导电胶直接固定于样品台。

截面制备：如需观察内部或断面结构，可采用液氮脆断、双刀切割等方式制取截面，并将断面朝上固定后进行观测。

四、生物样品

生物样品（如细胞、细菌、动植物组织等）通常具有含水量高、柔软、不导电等特点，其制样流程更为精细，核心目标是在干燥和真空条件下，最大限度地固定并保持其原始三维形貌。标准制样流程通常包括化学固定—梯度脱水—干燥—导电镀膜等关键步骤。关于详细的生物样品制样步骤与注意事项，请参见 QQ群文件：875339071——【扫描电镜生物样品常规制样方案】。

平台服务项目与模式

为充分发挥高端仪器对科研的支撑作用，本平台面向校内外用户，提供以下专业、灵活的【扫描电镜测试】与【生物样品制备】服务：

1、扫描电镜测试服务（ZEISS， Sigma 360）

2、生物样品专业制备服务

为解决生物样品制备的技术难点，平台提供专业的委托制备服务，确保含水、柔软样品的微观结构得以完好呈现。

【扫描电镜】预约与委托测试链接：

http://dygx1.cpu.edu.cn/lims/!equipments/equipment/index.798

【扫描电镜生物样品制备服务】送样链接：

https://dygx1.cpu.edu.cn/lims/!equipments/equipment/index.893.sample

仪器地点：江宁校区实训楼104东电镜室

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2026年1月7日